目的 观察转染Livin反义寡核苷酸(ASODN)对人胆管癌细胞株QBC939细胞Livin mRNA和蛋白表达的抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法 设计合成全硫代磷酸化修饰的Livin ASODN,脂质体介导Livin ASODN转染QBC939细胞,于转染后60h,噻唑蓝(MTT)法检测Livin反义寡核苷酸对QBC939细胞增殖的抑制作用,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染前后Livin mRNA表达的变化；细胞免疫荧光化学检测转染前后Livin蛋白的表达变化；膜联蛋白V(Annexin V)-藻红蛋白(PE)流式细胞仪(FCM)法检测转染后细胞凋亡变化.结果 实验分反义(Livin ASODN)组、错义(Livin NSODN)组、脂质体组、空白对照组.转染后60 h,MTT法显示Livin ASODN组能明显促进胆管癌细胞的凋亡(46.41±1.13、3.10 ±0.44、2.66±0.26、0)；RT-PCR显示Livin ASODN组LivinmRNA表达水平明显低于各对照组(54.96 ±3.00、88.31 ±2.50、85.90±0.62、90.36±2.43)(P＜0.05)；细胞免疫荧光化学法显示Livin ASODN组Livin蛋白表达明显低于各对照组(39.05±2.52、8.60 ±3.60、6.37 ±2.71、0)(P＜0.05)；流式细胞仪分析结果显示Livin ASODN组的细胞凋亡明显高于各对照组[(36.98±4.09)％、(3.77±0.25)％、(7.51±0.30)％、(6.83±0.23)％].结论 脂质体介导转染Livin ASODN能特异性抑制QBC939细胞中的Livin基因表达,下调Livin蛋白的表达,抑制胆管癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡。
转染Livin反义寡核苷酸对人胆管癌QBC939细胞凋亡影响及机制
【摘 要】
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目的 观察转染Livin反义寡核苷酸(ASODN)对人胆管癌细胞株QBC939细胞Livin mRNA和蛋白表达的抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法 设计合成全硫代磷酸化修饰的Livin ASODN,脂质体介导Livin ASODN转染QBC939细胞,于转染后60h,噻唑蓝(MTT)法检测Livin反义寡核苷酸对QBC939细胞增殖的抑制作用,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染前后Li
【机 构】
：
050000石家庄,河北省卫生厅考试培训中心,河北医科大学第二医院,华药医院手术室,河北医科大学第二医院,河北医科大学第二医院
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2013年30期
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