华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuhuwuyang
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以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)为出发菌株,提取总DNA,PCR扩增出前导肽脂肪酶基因(proRCL)及成熟肽脂肪酶基因(mRCL),克隆到原核载体pET-28a,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达并纯化出活性目的蛋白。经SDS—PAGE分析,重组蛋白ProRCL和MRCL的分子量分别约43kD和33kD。两重组脂肪酶主要酶学性质基本相似,最适反应温度均为35℃,40℃下较为稳定;最适反应pH相近,分别为8.0和8.5;以pNP脂肪酸酯为底物,均对短链
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