【摘 要】
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目的克隆小鼠疱疹病毒侵入介体（HVEM）基因,构建其重组腺相关病毒载体,鉴定目的基因在真核细胞中表达。方法用RT-PCR法从小鼠脾脏淋巴细胞克隆出全长HVEM基因,构建携带HVEM基因
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划资助项目（No.2009CB521800）, 国家自然科学青年基金资助项目（No.30901586）
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目的克隆小鼠疱疹病毒侵入介体（HVEM）基因,构建其重组腺相关病毒载体,鉴定目的基因在真核细胞中表达。方法用RT-PCR法从小鼠脾脏淋巴细胞克隆出全长HVEM基因,构建携带HVEM基因的穿梭质粒pAAV-IRES-HVEM-hrGFP和辅助质粒pAAV-RC及pAAV-Helper,利用磷酸钙共沉淀法将穿梭质粒共转染入AAV-293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-HVEM。用氯仿-PEG8000法纯化病毒,实时荧光定量PCR测病毒滴度。RT-PCR检测rAAV-HVEM在
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