【摘 要】
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目的 探讨芳香烃受体敲除(AhR KO,AhR-/-)小鼠的饲养、繁育、基因分型和生物学特征,并初步应用于严重创伤研究.方法 引进C57BL/6背景的AhR杂合子(+/-)小鼠;配对繁殖后提取仔
【机 构】
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中国人民解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目;重庆市自然科学基金资助项目
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目的 探讨芳香烃受体敲除(AhR KO,AhR-/-)小鼠的饲养、繁育、基因分型和生物学特征,并初步应用于严重创伤研究.方法 引进C57BL/6背景的AhR杂合子(+/-)小鼠;配对繁殖后提取仔鼠脚趾基因组脱氧核糖核酸(DNA),通过聚合酶链反应对仔鼠基因型进行鉴定;观察不同基因型仔鼠的生活状态、存活率和体重变化差异等生物学特征;制备AhR-/-和AhR野生型(WT,+/+)小鼠“骨折/失血”模型并收集骨髓细胞,采用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)体外诱导培养骨髓来源树突状细胞(BMDC)7 d,脂多糖(LPS)刺激24h后ELISA检测不同品系来源BMDC炎性因子分泌水平的差异.结果 AhR-/-小鼠的饲养和繁殖均获得成功,子代小鼠基因型分布符合孟德尔分离定律;相对AhR+/+小鼠而言,AhR-/-小鼠发育迟缓,体型小,体重轻(P＜0.05),生活状态差,存活率偏低(P＜0.05);严重创伤后AhR-/-小鼠来源的成熟BMDC分泌α型肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素(IL)-6的能力高于AhR+/+,(P＜0.05),而IL-10的分泌水平则低于AhR+/+ (P＜ 0.05).结论 通过AhR+/-繁育和适当的基因分型技术是获得表型稳定的AhR-/-的有效方法;严重创伤后AhR-/-来源的BMDC分泌炎性细胞因子的水平与AhR+/+来源BMDC存在显著差异,提示AhR与严重创伤后机体的炎性反应有关.
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