PKC-NF-κB信号传导对子痫前期患者脐血清诱导脐动脉平滑肌细胞胶原mRNA表达影响的体外研究

来源 :中华围产医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zch_kitty
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目的 探讨蛋白激酶C-核因子-kappa β(protein kinase C-nuclearfactor-kappaB,PKC-NF-κB)信号传导通路对子瘌前期患者脐静脉血清诱导脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)增殖及前胶原Ⅰ、ⅢmRNA的表达的影响。方法 采用组织块培养法培养正常妊娠HUASMC,传代,待细胞长满至70%~80%,加或不加PKC的抑制剂多黏菌素B(ploymyxin B,PMB)作用30min后分别加入子瘌前期患者脐静脉血清,培养2h,Western印迹法测定细胞胞浆Ⅰ-κB、胞核NF-κB活性;细胞培养48h,MTT测定细胞活力,流式细胞学测定细胞周期,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)测定HUA-SMC的bcl-3及前胶原Ⅰ、ⅢmRNA的表达。结果 子瘌前期患者血清组HUSMC的胞浆Ⅰ-κB含量(0.3765±0.0321)明显低于对照组(0.7857±0.0296),胞核NF-κB含量(0.8549±0.0395)、bcl-3表达(0.6782±0.213)、细胞活力(0.249±0.0748)、前胶原Ⅰ的表达(0.7387±0.208)、S期细胞百分比(20.13±1.21)%及G2/M期细胞百分比(16.45±0.89)%明显高于对照组(P〈0.01),G0+G1期细胞百分比(62.53±2.85)%明显低于对照组(P〈0.01)。PMB预处理组Ⅰ-κB含量(0.8120±0.0352)明显高于子瘌前期组(P〈0.01);NF-κB核转位(0.4528±0.0315)、bcl-3表达(0.216±0.193)、S期细胞百分比(8.21±0.56)%及G2/M期细胞百分比(5.38±0.52)%、细胞活力(0.1525±0.0454)及前胶原Ⅰ(0.3084±0.022)的表达低于子瘌前期组(P〈0.01),G0+G1期细胞百分比(89.61±3.18)%明显高于子痴前期组(P〈0.01)。结论 PKC-NF-κB信号传导途径的激活在子痴前期患者胎盘血管病变过程中可能起重要作用。

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