携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体的构建及表达

来源 :四川大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:skybabay
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目的构建携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体,并研究其在CD4^+CD25^-T细胞中的表达。方法构建含鼠Foxp3基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子慢病毒载体。采用脂染法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,经共培养法感染免疫磁珠分离的小鼠CD4^+CD25^-T细胞,流式细胞术(FCM)检测基因转导效率,通过RT-PCR及WesternBlotting法分别从mRNA和蛋白水平检测Foxp3的表达。结果成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-IRES-GF
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