【摘 要】
:
为了明确IL20RB、ATP6V0A1和STX10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的增殖作用,利用CRISPR/Cas9技术在PK15-CD163-Cas9细胞和IPEC-J2-Cas9细胞(笔者所在实验室前期制备)中分别敲除这3个基因,用PRRSV感染基因敲除的3种细胞(PK15-CD163-Cas
【机 构】
:
华中农业大学动物科学技术学院与动物医学院,武汉430070
论文部分内容阅读
为了明确IL20RB、ATP6V0A1和STX10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的增殖作用,利用CRISPR/Cas9技术在PK15-CD163-Cas9细胞和IPEC-J2-Cas9细胞(笔者所在实验室前期制备)中分别敲除这3个基因,用PRRSV感染基因敲除的3种细胞(PK15-CD163-Cas9-ATP6V0A1、PK15-CD163-Cas9-IL20RB和PK15-CD163-Cas9-STX10),荧光定量PCR检测PRRSV的ORF7基因表达水平,分析PRRSV增殖情况;用PEDV感染基因敲除的3种细胞(IPEC-J2-Cas9-ATP6V0A1、IPEC-J2-Cas9-IL20RB和IPEC-J2-Cas9-STX10),荧光定量PCR检测PEDV的N蛋白基因表达水平,分析PEDV增殖情况.结果显示,在3个基因分别被敲除的PK15-CD163-Cas9-ATP6V0A1、PK15-CD163-Cas9-IL20RB和PK15-CD163-Cas9-STX10细胞中病毒基因ORF7表达水平均显著低于未敲除基因的细胞(PK15-CD163-Cas9-NC,对照组),在3个基因分别被敲除的IPEC-J2-Cas9-ATP6V0A1、IPEC-J2-Cas9-IL20RB和IPEC-J2-Cas9-STX10细胞中PEDV的N蛋白基因表达水平均显著低于未敲除基因的细胞(IPEC-J2-Cas9-NC,对照组),表明敲除这3个基因对PRRSV和PEDV增殖均具有显著的抑制作用,ATP6V0A1、IL20RB和STX10对PRRSV和PEDV增殖均具有重要调控作用.
其他文献
植物甾醇为植物油中的一种天然组分,主要包括β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇等一类以环戊烷全氢菲为骨架的天然生理活性物质,是植物细胞膜的重要组成成分,同时也是多种激素、维生素D及甾体化合物合成的前体.其广泛存在于植物油类、坚果种子类、豆类、蔬菜水果及薯类等植物中,具有降低胆固醇含量、抗氧化、促生长、免疫调节等多种生理功能,可作为一种绿色安全的饲料添加剂.本文从植物甾醇的来源、性质、吸收、主要的生理功能以及在动物生产中的应用进行了综述,以期为后续研究及在畜禽饲料上的广泛应用提供参考依据.
为筛选标记基因用于植物遗传转化,采用组织培养、营养液筛选和叶面喷施等手段,综合评价了具有高催化活性的亚磷酸脱氢酶基因ptxDQ作为筛选标记基因用于水稻遗传转化的潜力.结果显示,ptxDQ基因作为筛选标记基因时,抗性愈伤的筛选效率为44.37%~47.28%,显著高于潮霉素和草胺磷等抗性基因的筛选效率.获得的转基因阳性幼苗,可利用以亚磷酸盐为唯一磷源的培养液,通过简单培养即可筛选出阳性转基因幼苗.此外,还建立了通过叶面喷施亚磷酸盐筛选转基因幼苗的方法.相比目前的抗生素和除草剂类筛选系统,亚磷酸盐更廉价且不会
浮皮是宽皮类柑橘常见生理性病害.基于国内外文献分析,指出柑橘浮皮果实具有果面粗糙,果皮发泡、粗厚、易腐烂,海绵层松散、塌陷、无序,果皮与果肉分离、空隙大的症状,果肉糖、酸含量低,囊瓣膜厚硬,汁胞失水硬化的品质特征,并从果实大小、成熟期、矿质营养、气候因素等方面阐述果实浮皮发生的条件,从细胞水平、生理水平及分子水平等方面揭示果实浮皮发生的机制.根据柑橘果实浮皮的“不同步发育”机制,提出亟需从源-库供应、竞争抑制和整体协调3个层面开展深入研究,力求通过“整体协调”与“靶向调节”破解柑橘果实浮皮难题.
分析长江流域施用氮、磷和钾肥对水稻的增产效应及其影响因素的贡献率,为该水稻种植区域的养分管理提供依据.数据来源于国际植物营养研究所在中国长江流域开展的水稻田间试验以及通过在中国知网检索关键词为“水稻”“水稻+产量”的文献,符合Meta分析标准的氮磷钾数据分别有1107、745和785组.以不施肥处理作为对照,以反应比作为增产效应值,利用Meta分析方法探究施肥对长江流域中稻的增产效应及其影响因素.与不施氮、磷或钾肥处理相比,长江流域中稻施用氮、磷和钾肥均具有显著的增产效应,施用氮、磷和钾肥的产量分别平均增
郁金香是荷兰、土耳其等多国的国花,但其主要的起源中心位于中国和中亚国家接壤的天山山脉和帕米尔高原地区.1000多年前突厥人发现了天山山谷中的郁金香,并在奥斯曼帝国进行了大量传播和种植.1559年布斯拜克将郁金香带到维也纳,并于1573年由“郁金香之父”克卢修斯带到荷兰莱顿.荷兰作为郁金香大国,收藏了约2400份郁金香种质资源.其他国家如土耳其、英国、以色列、捷克、波兰及中国都收藏保存了数百份郁金香种质资源.郁金香的育种目标包括花色、花香、花形、花期、瓶插期、抗热性、抗病性、低需冷量、种球繁育等.通过系统驯
为探究施用不同原料生物炭对酸性土壤改良及氮素矿化作用和硝化作用的影响,以酸性红壤为供试土壤,添加水稻秸秆、稻壳及木屑3种原料制备的生物炭,开展为期50 d的室内培养试验.设置空白对照(CK)、单施化学肥料(F)、水稻秸秆生物炭+化学肥料(B1)、稻壳生物炭+化学肥料(B2)、木屑生物炭+化学肥料(B3)共5个处理,测定土壤基础理化性质、酶活性及铵态氮与硝态氮含量,分析土壤性质与氮素转化之间的关系.结果表明:水稻秸秆生物炭对土壤pH提高效果高于木屑生物炭和稻壳生物炭,与CK和F处理相比,B1处理使土壤pH提
在昆虫与植物协同进化过程中,昆虫成功定位寄主植物决定其食性及生态位.实蝇类昆虫是世界范围内分布的重要果蔬害虫,在定位寄主植物过程中,实蝇视觉和嗅觉发挥重要作用,利用寄主颜色和气味模拟的诱捕装置能够有效诱杀实蝇,但诱杀效果参差不齐.因此,本文对实蝇类昆虫视觉、嗅觉定位寄主植物的行为和相关分子基础进行了阐述,介绍了有关的应用成果,并对未来的方向进行了展望,以期为建立实蝇类害虫可持续的绿色防控技术奠定基础.
为明确板栗采后优势致腐真菌种类及植物精油对其控制效果,采用组织分离法对引起板栗采后腐败的病原真菌进行分离纯化,通过显微观察和双基因系统发育分析对优势致腐菌作进一步的形态学和分子生物学鉴定,并在此基础上分析紫苏醛、肉桂醛、柠檬醛、叶醛、丁香酚、芳樟醇、橙花醇、麝香草酚、香芹酚、香茅醇植等10种植物精油单组分对板栗采后优势病原真菌的控制效果.结果显示,板栗采后优势致腐菌包括镰孢属、新壳梭孢属、地霉属和毛霉属在内的多种真菌,其中菌株BL-8和BL-18经双基因系统发育分析鉴定为亚洲镰孢菌(Fusarium as
为探究马家柚及原产地周边主要柚类株系遗传关系和来源并筛选出适宜授粉株系,利用SSR分子标记技术对江西省广丰县及周边地区共46份柚资源进行遗传关系鉴定,并对不同杂交授粉组合的马家柚进行连续2a的果实品质相关指标分析.结果表明:马家柚在长期实生繁殖与人工选择过程中发生了明显变异,极有可能由广丰及周边地区的本地土柚经长期自然与人为的双向选择衍变而来;不同杂交授粉组合中以土柚4号对马家柚果实品质提升效果最佳,为目前马家柚较为适宜的授粉父本株系.
依托长期(1989―)定位试验,田间试验设置5个处理:氮磷钾(NPK)、氮磷钾+花生秸秆(NPK+PS)、氮磷钾+绿肥(NPK+FR)、氮磷钾+腐熟猪粪(NPK+PM)、只施氮钾(CK),研究不同施肥措施对旱地红壤剖面磷素形态变化与累积特征的影响.结果显示:长期施磷肥显著增加红壤中全磷和速效磷的含量,提升土壤磷活化系数(PAC);相关分析表明,中等活性有机磷(MAOP)和无机磷中的磷酸铝盐(Al-P)、磷酸铁盐(Fe-P)与有效磷呈显著相关(P<0.05).对照处理土壤中无机磷以闭蓄态(O-P)为主(64