德国小蠊主要变应原Bla g2在毕赤酵母菌中的表达

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zouximu19840420
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目的 在毕赤酵母菌(Pichia pastoris)中表达德国小蠊主要变应原Blag2,以获得其可溶性蛋白.方法 根据已知的Bla g 2基因序列设计带有酶切位点的引物,PCR扩增德国小蠊变应原Bla g2基因,经酶切后将该基因连接到毕赤酵母真核表达载体pGAPZaA,获重组质粒pGAPZaA-Bla g 2,该重组质粒线性化后,经电转化法转化毕赤酵母GS115,用PCR筛选出重组子并在YPD培养基中表达.用Ni52+亲和层析法纯化重组蛋白Bla g2,用蛋白质印迹(Western blotting)分析
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