【摘 要】
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以猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)标准强毒石门株为模板,RT-PCR扩增CSFV E2基因N端的主要抗原区(ΔE2)。PCR产物定向克隆至原核表达载体pET-32a中,构建了重组表达质
【机 构】
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湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,华中农业大学动物医学院.武汉430070
【基金项目】
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湖北省科技攻关项目(2007AA402C55),湖北省农业科技创新中心资助项目(2007-620-004-003-1)
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以猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)标准强毒石门株为模板,RT-PCR扩增CSFV E2基因N端的主要抗原区(ΔE2)。PCR产物定向克隆至原核表达载体pET-32a中,构建了重组表达质粒pET-ΔE2,转化Eacterium coli BL21-Codonplus(DE3),IPTG诱导重组ΔE2蛋白表达,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定蛋白的正确表达。KCl预染切胶法纯化ΔE2蛋白,以其为包被抗原,通过反应条件的优化,建立了CSFV抗体ELIS
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