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目的：构建高效分泌表达重组人淀粉样蛋白前体 Kunitz 型蛋白酶抑制剂结构域变异体（rhKD／APPvar）的毕氏酵母工程菌，建立适合大规模发酵、纯化 rhKD／APPvar的工艺。方法：利用已构建的 rhKD／APP表达质粒，在其活性中心两侧设计2个酶切位点（ApaⅠ和SacⅡ），实现人 KD／APP 活性中心 RAM 与BPTI活性中心KAR的替换，构建 rhKD／APPvar表达质粒。将重组质粒转化到酵母菌 X-33中，优化 rhKD／APPvar表达最佳 pH值，使 rhKD／APPvar获得高