【摘 要】
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目的研究缺血再灌注后肝组织中早期反应基因1(Egr 1)的表达.方法动脉放血至平均动脉压(MAP)25 mmHg,分别维持1 h或2.5 h,复制小鼠整体肝缺血模型;2.5 h后,回输失血+2倍于失血
【机 构】
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北京市,Department of Surgery
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目的研究缺血再灌注后肝组织中早期反应基因1(Egr 1)的表达.方法动脉放血至平均动脉压(MAP)25 mmHg,分别维持1 h或2.5 h,复制小鼠整体肝缺血模型;2.5 h后,回输失血+2倍于失血量的平衡液至MAP 80 mmHg,复制小鼠肝缺血再灌注模型.取肝组织,分别通过Northern印迹法、凝胶电泳迁移分析(EMSA)、蛋白质免疫印迹法,检测肝组织mRNA的表达;肝核提取物中Egr-1蛋白与DNA的结合活性;肝组织、胞浆及核提取物中Egr-1蛋白的表达.结果缺血1 h后,Egr-1mRNA在肝组织中的表达明显增强;缺血2.5 h后肝组织中Egr-1mRNA虽有所下降,但表达水平仍较高.缺血2.5 h+再灌注4 h后,肝组织中Egr-1mRNA消失.缺血2.5 h和缺血2.5 h+再灌注4 h后肝细胞核提取物中Egr-1蛋白的DNA结合活性增加.缺血2.5 h及缺血2.5 h+再灌注4 h肝组织及肝细胞核提取物中Egr 1蛋白表达明显增加;Egr-1蛋白仅在缺血2.5 h肝胞浆提取物中表达.结论本实验结果表明肝缺血再灌注后Egr-1mRNA和蛋白表达均明显增强,其DNA结合活性增加,说明其转录和翻译水平均增加.本研究显示缺血再灌注后肝脏中Egr 1基因被激活,Egr-1可能参与了肝I/R后炎症反应基因的调节,并在肝损伤中起一定的作用.
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