【摘 要】
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利用Minitab软件进行DOE(Design of experiment,实验设计),考察不同基础培养基、流加物和基础添加物对工程细胞株B2-14(CHO DG44)的细胞密度和抗TNF-α全人抗体表达量的影响.
【机 构】
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中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009;天士力控股集团研究院生物药品研究所,天津300410
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利用Minitab软件进行DOE(Design of experiment,实验设计),考察不同基础培养基、流加物和基础添加物对工程细胞株B2-14(CHO DG44)的细胞密度和抗TNF-α全人抗体表达量的影响.其中基础培养基筛选采用单因素设计实验,流加物和基础添加物的筛选采用全因子分析实验设计.结果表明,经过培养工艺优化,工程细胞株B2-14的最大密度由最初的3.2×106 cells/mL增加到1.31×107cells/mL,蛋白表达量由72 mg/L增长到421 mg/L,分别增加309％和485％.同时发现,在工程细胞株生长过程中添加必需氨基酸、维生素、葡萄糖和微量元素,给予细胞必要的营养成分,有助于细胞数量的增长和活力的提高,也有利于抗体蛋白表达量的增加.生长因子虽有利于细胞的增长,但对蛋白的表达无影响.而脂类物质及胆固醇可以有效的提高抗体的表达量,但是过多会对细胞的生长有抑制作用.
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