【摘 要】
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目的探究模板质量对RT-PCR结果的影响及分析其影响因素。方法从大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中提取总RNA进行逆转录,产物进行PCR、NanoDrop检测其质量。选用不同浓度PCR产物及加入
【机 构】
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吉林医药学院临床生物化学检验教研室
【基金项目】
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吉林省教育厅资助课题(JJKH20170418KJ),吉林省卫生与健康技术创新项目(2018J113),2019年国家级大学生创新创业训练计划.
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目的探究模板质量对RT-PCR结果的影响及分析其影响因素。方法从大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中提取总RNA进行逆转录,产物进行PCR、NanoDrop检测其质量。选用不同浓度PCR产物及加入不同浓度标准蛋白(BSA)进行PCR,并进行琼脂糖凝胶电泳。凝胶成像仪分析不同浓度蛋白质对PCR终产物量的影响,Image J软件对PCR产物定量分析。结果模板质量低时,模板量与PCR产物量成反比,且选取质量不佳的模板会产生非特异性条带;模板质量高时,模板量与PCR产物量成正比,且未见非特异性条带;模板受杂质污染(如蛋白质污
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