【摘 要】
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目的构建基因变构IL-2(88N→R)的重组克隆,并将其在原核系统中进行高效表达,为研究基因变构IL-2(88N→R)的生物学活性奠定基础.方法分离人体T细胞经PHA刺激活化后,提取细胞的
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目的构建基因变构IL-2(88N→R)的重组克隆,并将其在原核系统中进行高效表达,为研究基因变构IL-2(88N→R)的生物学活性奠定基础.方法分离人体T细胞经PHA刺激活化后,提取细胞的RNA为模板,逆转录构建cDNA文库,经套式PCR扩增出编码IL-2的基因,插入T-A载体后获得编码天然IL-2的克隆,核苷酸测序证实成功后,自行设计含有突变位点的引物,利用重组PCR技术,进行定点诱变构建基因变构IL-2(88N→R的重组克隆,DNA测序确认变构成功.将改构后的IL-2基因重组于原核pGEX-4T-2质
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