新城疫病毒F48E9株F-HN蛋白融合基因在毕赤酵母中的表达

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利用重叠PCR技术拼接新城疫病毒F蛋白基因和HN蛋白基因,并将构建好的融合基因克隆到载体pET28a,经测序后融合基因插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOXI和OL交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白F-HN。重组质粒pPIC9K—F—HN经SacI线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,经G418筛选得到转化子。PCR扩增鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,目的蛋白为分泌性表达,分子量约为86.5ku;Western—blot结果表明融合蛋白具有良好的免疫反应性,为下一步研究高效
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