东亚飞蝗prolixicin基因的克隆与表达分析

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猎蝽素(Prolixicin)是最先发现于长红猎蝽Rhodnius prolixus中的一种抗菌肽.本研究通过分析东亚飞蝗[Locusta migratoria manilensis(Meyen)]转录组数据库,获得东亚飞蝗prolixicin基因的cDNA序列,命名为LmProx.LmProx全长394 bp,包含一个282 bp的完整开放阅读框,编码93个氨基酸,理论分子量(Mr)为9.97×103.氨基酸序列的N端有一个信号肽,C端有一个富含甘氨酸的G结构域.同源性分析表明LmProx与长红猎蝽的prolixicin同源性最高,一致性为48%,相似性为60%.进化关系分析表明,LmProx与长红猎蝽prolixicin的亲缘关系最近.基因定量分析显示,大肠杆菌刺激后2 h,LmProx的表达明显上调,至8 h表达量达到最高,随后开始缓慢下降,但仍然维持较高的表达水平,直到72 h还显著高于对照.在未经大肠杆菌诱导的东亚飞蝗中,LmProx在脂肪体中的表达水平最高,其次是中肠,在头部和体壁中的表达水平较低;在诱导后的东亚飞蝗中,脂肪体和中肠中的LmProx表达显著增高,而头部和体壁中的表达水平没有变化.研究结果显示LmProx基因在大肠杆菌侵染后,迅速表达,且能持续较长时间的高水平表达,说明LmProx基因在东亚飞蝗的免疫防御过程中起着重要作用;脂肪体和中肠是LmProx基因主要诱导表达的器官.
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