目的探讨甲苯二异氰酸酯(TDI)对人支气管上皮细胞(16HBE)自噬的活化及炎性因子人白细胞介素(IL)-4、IL-6表达的影响。方法①制备TDI-人血清白蛋白(HSA),测定TDI-HAS中TDI的质量浓度。②分别以剂量为0.00～400.00 mg/L的TDI-HSA和HSA处理细胞12 h后,以CCK-8实验测定细胞存活率,选择后续实验的TDI-HSA和HSA处理剂量。③分别以剂量为0.00～120.00 mg/L的TDI-HSA和HSA处理细胞12 h后,以流式细胞仪检测细胞中活性氧(ROS)水平,以酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL-4和IL-6的水平。④以剂量为0.00～120.00 mg/L的TDI-HSA处理细胞12 h后,在透射电子显微镜下观察细胞自噬活动,以蛋白免疫印迹法测定酵母自噬相关基因6 (Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3β)和泛素结合蛋白P62的蛋白相对表达水平。结果①40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组中TDI的质量浓度分别为0.44、0.89、1.33 mg/L。②CCK-8实验结果显示,剂量为120.00 mg/L以下的TDI-HSA和HSA不影响细胞存活率,选择0.00～120.00 mg/L为后续实验的TDI-HSA和HAS处理剂量。③40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组16HBE细胞中ROS水平和细胞上清液中IL-4、IL-6的水平均高于同剂量HSA组(P<0.01);16HBE细胞中ROS水平和细胞上清液中IL-4、IL-6的水平均随着TDI-HSA剂量的增加而增加(P<0.01)。④透射电镜观察显示,与0.00 mg/L组比较,40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组16HBE细胞内自噬溶酶体数量明显增多,线粒体空泡化数量增加。随着TDI-HSA剂量的增加,16HBE细胞上清液中Beclin1蛋白相对表达水平及LC3β-Ⅱ/Ⅰ比值逐渐升高(P<0.05),P62蛋白相对表达水平逐渐下降(P<0.01)。结论 TDI-HSA可诱导16HBE细胞ROS及炎性因子表达水平升高并诱导自噬的活化;细胞自噬可能是TDI诱导职业性哮喘发生中气道炎症反应的重要因素。