【摘 要】
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针对检测过程中影响病毒富集的主要因素,按正交试验设计了9种不同的病毒富集方法,利用RT-PCR对富集方法进行检测和分析评价。结果表明,吸附缓冲液pH对NVs富集有显著影响(P<0.
【机 构】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,中国海洋大学食品科学与工程学院,上海海洋大学食品学院
【基金项目】
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国家863计划项目(2007AA09Z438);山东省科技攻关项目(2007GG10005015)共同资助
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针对检测过程中影响病毒富集的主要因素,按正交试验设计了9种不同的病毒富集方法,利用RT-PCR对富集方法进行检测和分析评价。结果表明,吸附缓冲液pH对NVs富集有显著影响(P<0.05),吸附剂、沉淀剂种类对富集作用无显著差异(P>0.05)。在吸附缓冲液中性环境(pH7.5)下,以苏氨酸作为吸附剂吸附两次,用PEG6000与PEG8000混合沉淀两次为最优富集方法,病毒回收率为23%,检测灵敏度为150pgRNA。利用此法对青岛地区贝类样品进行了检测,阳性检出率为12.5%,表明优化的富集方法可以满足实际检测的要求。
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