荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究

来源 :黑龙江畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hengkuan

【摘要】

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试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤雏细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究。结果表明：用DMEM／F12＋20％胎牛血清＋100IU／mL双抗的完全培养液进行组织块培养，能获得良好的荷斯坦

【作者】

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王亮刘婷婷彭涛朱海汪汉卿曹旭

【机构】

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中国科学院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室,新疆金牛生物股份有限公司,中国科学院新疆理化技术研究所,中国科学院北京研究生院

【出处】

：

黑龙江畜牧兽医

【发表日期】

：

2006年5期

【关键词】

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荷斯坦奶牛成纤维细胞体外培养冷冻保存活细胞率细胞贴壁率 Holstein milk cow fibroblast in vitro cultur

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（30471242）：中科院“百人计划”2002年第1期

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试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤雏细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究。结果表明：用DMEM／F12＋20％胎牛血清＋100IU／mL双抗的完全培养液进行组织块培养，能获得良好的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞原代培养物；成纤维细胞混合培养物经Trypsin-EDTA（0．25％Trypsin，1mmol／LEDTA．4Na）消化所收集到的细胞主要为成纤维细胞，经2—3代传代，可得到纯化的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞。纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的每件下，选用5种不同的冷冻保存方法进行冷冻

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