抗人脑微血管内皮细胞单域抗体P5的制备及对人和大鼠血脑屏障的影响

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目的制备抗人脑微血管内皮细胞单域抗体P5,研究P5对大鼠血脑屏障结构的影响。方法采用PCR技术将已获得的P5基因片段克隆至载体pET-30a—c并测序确证,重组载体经转化诱导后通过Western blot鉴定。采用免疫荧光和免疫组织化学方法观察P5在人及大鼠脑微血管内皮细胞中的结合水平,透射电镜观察大鼠血脑屏障超微结构的变化。结果Western blot结果显示表达产物的分子量为128kD,随着单域抗体P5(1μg/m1)作用时间的延长,P5与人及大鼠的脑微血管内皮细胞结合水平增加。透射电镜结果显示随着给
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