【摘 要】
：
目的 探讨4种不同免疫抑制剂(他克莫司、环孢素A、雷帕霉素、雷公藤多甙)对Caco-2和HT-29细胞人β防御索1和2(hRD-1/2)的表达影响及机制.方法 通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测终质量浓度为10 μmol/L的4种不同免疫抑制剂对白细胞介素-1β(IL-1β,20μg/L)诱导的人肠上皮细胞hBD-1/2表达的影响,应用凝胶电泳迁移
【机 构】
：
350001福州,福建医科大学附属协和医院肝胆外科,350001福州,福建医科大学附属协和医院肝胆外科,350001福州,福建医科大学附属协和医院肝胆外科,350001福州,福建医科大学附属协和医院肝
论文部分内容阅读
目的 探讨4种不同免疫抑制剂(他克莫司、环孢素A、雷帕霉素、雷公藤多甙)对Caco-2和HT-29细胞人β防御索1和2(hRD-1/2)的表达影响及机制.方法 通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测终质量浓度为10 μmol/L的4种不同免疫抑制剂对白细胞介素-1β(IL-1β,20μg/L)诱导的人肠上皮细胞hBD-1/2表达的影响,应用凝胶电泳迁移率实验法(EMSA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Caco-2细胞核子-κB(NF-κB)的表达.结果 肠上皮细胞组成性表达hBD-1；他克莫司、环孢素A和雷帕霉素组在Caco-2细胞中hBD-2 mRNA促进率分别为(20.58±1.02)％、(139.49±6.97)％和(425.97 ±21.29)％,雷公藤多甙组hBD-2 mRNA抑制率为(48.59±2.42)％ (P＜0.05).HT-29细胞中上述指标分别为(62.52±3.25)％、(20.56±1.10)％、(46.79±2.28)％和(82.73±7.88)％(p＜0,05).Caco-2细胞中hBD-2蛋白的表达与mRNA的表达趋势一致.EMSA和ELISA检测活化的NF-κB显示他克莫司、环孢素A和雷帕霉素组促进NF-κB的活化,雷公滕多甙组抑制NF-κB的活化.并与Ser276磷酸化有关.结论 他克莫司、环孢素A和雷帕霉素促进人肠系细胞在IL-1β3诱导下表达hBD-2,雷公藤多甙抑制hBD-2的表达.其机制与NF-κB信号途径有关。
其他文献
Notch基因最早发现于果蝇体内,1940年Notch基因位点被发现,1983年Notch基因被首次克隆[1].并指出Notch信号在生物发育、细胞分化的过程中有很重要的作用[2].Notch4是Notch家族较为特殊的蛋白,只在哺乳动物中表达,相对分子质量小,被认为是肿瘤治疗的新靶点[3],在结肠癌的表达及意义研究很少,需要进一步探讨.我们通过对比溃疡性结肠炎与结肠癌组织中Notch4的表达,探
我们前期的研究表明,上调p21-激活激酶1(Pak1)基因的表达能促进结直肠癌细胞的迁移和侵袭.其机制在于,Pak1以激酶依赖性的方式激活细胞外信号调节激酶(ERK)-黏着斑激酶(FAK)-丝氨酸(Ser)-910通路,导致有利于细胞移动的细胞骨架重组[1].我们拟从Pak1基因调控血管形成和基质金属蛋白酶(MMPs)表达/活性两个方面探讨其诱导结直肠癌转移的机制。
目的 探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27(p27KiPl)在胃癌中的表达及其与基因启动子甲基化的关系.方法 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测97例胃癌标本p27KiPl蛋白的表达,并选取25例正常胃黏膜组织作对照,同时应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法对启动子甲基化进行检测.结果 正常胃黏膜组织中p27KiPl蛋白表达率明显高于胃癌组(x2=31.02,P＜
目的 探讨低能激光照射(LLLI)对大鼠梗死心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响和意义.方法 SD大鼠120只分为3组:假手术组、对照组、治疗组.通过结扎左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型.3周后进行LLLI,处理后各时间点采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法分别检测SOD活性和MDA含量,并做组织病理学观察.结果 LLLI 后1h至48 h,SOD活性明显高于
目的 观察洛铂(LBP)对人胃癌细胞株(SGC-7901)增殖、凋亡及Metadherin(MTDH)基因表达的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法检测LBP对SGC-7901细胞的杀伤抑制作用;流式细胞仪检测SGC-7901细胞的凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测MTDHmRNA及其蛋白的表达.结果 LBP可抑制胃癌SGC-7901的生长增殖,呈剂量-时
盐霉素(SAL)于1968年在白色链霉菌的培养物中首先发现[1],主要用于防治家禽的球虫病及仔猪的肥育.2009年Gupta等[2]对16 000种化合物进行检测,发现SAL具有抗乳腺癌干细胞(BCSCs)的能力.我们比较了SAL与常用化疗药物表阿霉素(EPI)、多西紫杉醇(DOC)对乳腺癌细胞的增殖抑制作用并观察SAL对干细胞比例和成球能力的影响。
目的 观察水浴加热联合吲哚美辛对人肝癌MHCC97L细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 42℃水浴加热前2h加入0.2 mmol/L吲哚美辛,加热组不加药,对照组不加热、不加药,其他处理相同并在同一时间点观察.在不同的时间观察细胞增殖、生长曲线、克隆形成率、流式细胞术(FCM)分析细胞周期、侵袭、运动、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达[酶联免疫吸附试验(ELISA)法
H-钙黏蛋白1(CDH1)基因位于染色体16q22.1,编码1种表达于上皮细胞内的嗜同种跨膜细胞黏附蛋白:E-钙黏蛋白(E-cadherin).此种蛋白在建立并维持细胞间连接、细胞极性以及组织构架方面起重要作用.近年来的研究结果显示,CDH1基因启动子的甲基化是在胃癌中导致这一抑癌基因沉默的最普遍机制.本研究旨在建立甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)法检测胃癌手术标本中的CDH1基因启动子的
目的 观察原发性肝癌（PLC）患者手术前后、介入治疗前后血清Dickkopf-1（DKKl）表达水平的变化。方法酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测30例正常人以及60例PLC患者血清DKKl水平，并比较20例I期PLC患者手术前后以及18例Ⅱ期PLC患者介入治疗前后血清DKKl水平。结果血清DKKl水平与PLC患者临床分期明显相关、与PLC患者性别、年龄无明显相关（P〉0．05）；PLC患者血清
本研究旨在观察缺氧诱导因子-1a（HIF—1a）、基质金属蛋白酶（MMP）-9、血管内皮生长因子（VEGF）在实验大鼠脑动脉瘤（CA）中表达及HIF-1a抑制剂强力霉素对大鼠CA形成的影响，