【摘 要】
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目的构建并瞬时转染P63和MASPIN报告基因质粒,检测转染前后MASPIN启动子活性的改变,初步探讨在卵巢癌中P63对MASPIN表达的调控作用。方法构建MASPIN报告基因质粒,并与P63质粒
【机 构】
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四川大学华西第二医院妇产科,绵阳市中心医院妇产科,成都地奥集团筛选中心,
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目的构建并瞬时转染P63和MASPIN报告基因质粒,检测转染前后MASPIN启动子活性的改变,初步探讨在卵巢癌中P63对MASPIN表达的调控作用。方法构建MASPIN报告基因质粒,并与P63质粒(TAP63、ΔNP63)共转染卵巢癌SKOV3细胞,荧光素酶测定转染后MASPIN启动子活性的变化情况;P63质粒体外瞬时转染卵巢癌SKOV3细胞,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测转染后MASPIN mRNA表达水平的变化。结果成功构建MASPIN报告基因质粒,并与P63质粒(TAP63、ΔNP63)共转染SKOV3细胞,荧光素酶报告基因法检测发现TAP63转染组MASPIN启动子活性高于空载体组和ΔNP63组(P<0.05),而后两组之间差异无统计学意义(P>0.05);P63质粒(TAP63、ΔNP63)瞬时转染SKOV3细胞,RT-PCR方法检测发现,TAP63转染组MASPIN mRNA表达高于未转染组、空载体组和ΔNP63组(P<0.05),而后3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TAP63能增强MASPIN启动子转录活性及MASPIN mRNA的表达,MASPIN可能是TAP63一个新的分子作用靶点。
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