目的 在体外研究中证明神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子能引导人钠碘转运体基因(hNIS)实现胶质瘤靶向性表达,并能有效介导放射性碘治疗胶质瘤。方法使用Lipofectamine2000脂质体将PGL3.Basic、PGL3-Control、PGL3.GFAP质粒分别转染至U251、U87、MRC-5细胞,24h后在化学发光仪中检测各细胞的相对反应活性;构建GFAP启动子引导hNIS基因表达的重组腺病毒Ad.GFAP.hNIS,转染至各细胞后Westernblotting检测细胞GFAP、hNIS蛋白的表达;同时设Ad—CMV—EGFP组(空白对照)和Ad.CMV—hNIS组(阳性对照),应用y计数器测量3组细胞的131I摄碘和外流能力,龙胆紫染色后记数细胞并计算克隆形成率:U87细胞接种BALB/c雌性裸鼠20只,按随机数字表法分4组(注射Ad-GFAP—hNIS、不注射131I,注射Ad—GFAP—hNIS、注射131I,注射Ad—CMV—EGFP、不注射131I,注射Ad—CMV—EGFP、注射131I,每组5只),各组进行相应处理后观察移植瘤生长情况并比较裸鼠生存周期;U87荷瘤裸鼠肿瘤内注射Ad—GFAP—bNIS和Ad.CMV—EGFP后腹腔内注射1mCi的^99mTcO4溶液,应用SPECT显像。结果与PGL3-Basic、PGL3.Control比较,PGL3-GFAP质粒转染后U251、U87细胞相对反应活性降低,差异有统计学意2Z(P〈0.05);Western blotting显示U87和U251细胞表达GFAP、hNIS蛋白;125I摄碘能力试验显示感染重组腺病毒Ad-GFAP—hNIS后,U87和U251细胞摄碘能力分别提高69.5倍和70.8倍,细胞内131I的有效半衰期缩短;在U87和U251细胞中,Ad-GFAP-hNIS组细胞克隆形成率分别为(9.31±0.50)%和(9.33±1.15)%,均高于Ad.CMV.EGFP组和Ad—CMV—hNIS组,差异有统计学意义(P〈0.05);注射Ad—GFAP.hNIS且注射131I组裸鼠生存周期(44.00±0.58)d最长;SPECT实验显示Ad-GFAP—hNIS组裸鼠肿瘤组织可以摄取放射性核素,而Ad—CMV—EGFP组裸鼠不能摄取。结论感染Ad-GFAP—hNIS后胶质瘤能靶向性摄取碘,并能引导有效的放射性碘治疗。
GFAP启动子介导放射性^131I靶向性治疗胶质瘤的实验研究
【摘 要】
:
目的 在体外研究中证明神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子能引导人钠碘转运体基因(hNIS)实现胶质瘤靶向性表达,并能有效介导放射性碘治疗胶质瘤。方法使用Lipofectamine2000脂质体将PGL3.Basic、PGL3-Control、PGL3.GFAP质粒分别转染至U251、U87、MRC-5细胞,24h后在化学发光仪中检测各细胞的相对反应活性;构建GFAP启动子引导hNIS基因表达的
【机 构】
:
天津医科大学总医院核医学科,天津300052,天津医科大学总医院核医学科,天津300052,天津医科大学总医院核医学科,天津300052
【出 处】
:
中华神经医学杂志
【发表日期】
:
2013年12期
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