制备柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16，CA16)感染性滴度检测用国家参考品，为CA16疫苗生产过程中的病毒滴度控制和CA16疫苗的免疫效果评价提供国家参考品。

将验证合格的CA16(C1亚型)培养液分装(0.5 ml/支)制成候选参考品。3个独立实验室分别对候选参考品进行协作标定，用细胞培养法检测CA16感染性滴度，用Behrens-Kärber法计算半数细胞感染量(50% cell culture infective does，CCID₅₀)。同时，将CA16参考品分别置于－20、4、22～25(室温)和37 ℃条件下或反复冻融，进行热稳定性、长期稳定性和冻存稳定性研究。

制备的CA16参考品的病毒滴度为(6.80±0.95) lgCCID₅₀/ml。CA16参考品于－60 ℃保存12个月、－20 ℃保存6个月和4 ℃保存28 d后的病毒滴度无显著下降，表明稳定性较好；在22～25 ℃(室温)和37 ℃条件下，CA16参考品每天的病毒滴度损失率分别为3.4%和4.4%，而且分别保存27和21 d后病毒滴度无明显下降；对CA16参考品反复冻融的病毒滴度损失率为4.8%/次。

成功制备了CA16感染性滴度检测用候选国家参考品，将CA16参考品赋值确定为(6.80±0.95) lgCCID₅₀/ml。