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目的构建稳定表达人GL50基因的小鼠成纤维母细胞L929细胞株,探讨GL50信号通路对T细胞的共刺激效应。方法Trizol一步法抽提人扁桃体细胞RNA,RT—PCR法扩增出GL50基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ—Term,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h,经Zeoein筛选出稳定表达GL50分子的1929细胞株;采用’It—TdR掺入实验观察GL50信号对T细胞体外培养的共刺激作用。结果成功构建含GIS0基因的重组逆转录病毒载体,并获得含有GL50基