【摘 要】
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目的探讨HIF-1α与前列腺癌发病机制之间相关性提供研究工具。方法采用Trizol法裂解细胞,提取HIF-1α且以该RNA为模板逆转录为cDNA,然后行PCR处理扩增HIF-1α基因功能片段区
【机 构】
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厦门大学附属第一医院泌尿外科,福建医科大学,厦门大学生命科学院
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目的探讨HIF-1α与前列腺癌发病机制之间相关性提供研究工具。方法采用Trizol法裂解细胞,提取HIF-1α且以该RNA为模板逆转录为cDNA,然后行PCR处理扩增HIF-1α基因功能片段区域,克隆至真核表达载体pcDNA3.1上,转化至大肠杆菌DH-5α,小提质粒,酶切凝胶电泳鉴定,序列测定,经鉴定为正确序列后中抽质粒,采用Fugene试剂转染至前列腺癌细胞PC-3,经G418筛选,建立稳定表达HIF-1α的前列腺癌细胞系pcDNA3.1-HIF-1α-PC-3,采用Western印迹鉴定重组质粒的表
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