【摘 要】
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目的构建人结肠癌细胞株HT29的RNA干扰（RNAi）表达载体以抑制黏着斑激酶（FAK）,检测FAK沉默后细胞对5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的变化。方法利用针对FAK基因的特异性寡核苷酸序列及对照
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目的构建人结肠癌细胞株HT29的RNA干扰（RNAi）表达载体以抑制黏着斑激酶（FAK）,检测FAK沉默后细胞对5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的变化。方法利用针对FAK基因的特异性寡核苷酸序列及对照序列构建重组体,酶切并测序鉴定,用脂质体2000转染细胞,G418筛选。采用RT-PCR和免疫组化检测干扰前后细胞内FAK的表达变化,MTT法检测细胞对5-FU敏感性的变化。结果酶切鉴定和测序证实插入序列完全正确。靶向FAK干扰后,免疫组化显示FAK蛋白表达显著降低,RT-PCR显示FAKmRNA的表达下调了7
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