池蝶蚌急性高温和菌刺激胁迫应答HSP70 B2-like的表达特征

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为探究热激蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)对池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)在应对不利环境胁迫时的作用,研究结合转录组测序和RACE-PCR获得池蝶蚌HSP70家族一个成员(暂命名:HSP70 B2-like)cDNA全长序列(2 209 bp),同源分析显示,该基因编码的蛋白含有HSP70家族的签名序列,C末端存在细胞质特异性调控信号EEMD。与其他物种的HSP70具有很高的相似性。进化树分析表明,获得序列与褶纹冠蚌HSP70亲缘关系最近,并和其他软体动物HSP70 B2亚家族聚为同一进化支。实时荧光定量PCR结果表明,池蝶蚌HSP70 B2-like在检测的多个组织中均有表达,且闭壳肌中表达量最高。经热刺激(37℃)后,池蝶蚌闭壳肌、肝胰腺、外套膜和肾中的HSP70B2-like mRNA表达快速上调,6 h达到峰值(P<0.01),随后逐渐下降。池蝶蚌鳃和血细胞中的HSP70 B2-like mRNA表达量则是先降后升再回落。但血细胞、外套膜和肾中的HSP70 B2-like在48 h再次出现表达上调。注射嗜水气单胞菌后,HSP70 B2-like在肝胰腺、血细胞和闭壳肌的表达量均有显著上升,6 h开始上调(P<0.05),持续到24 h,到48 h回落。而鳃中的HSP70 B2-like基因的表达则是先降后升再回落。研究结果表明,池蝶蚌HSP70 B2-like是一个应激蛋白基因,可能在机体耐受高温胁迫和抗病原菌浸染时发挥重要作用。
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