【摘 要】
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目的:利用转基因细胞法建立重组人促卵泡激素Fc融合蛋白（rhFSH-Fc）生物学活性检测方法。方法:利用CHO-K1-FSHR-CRE-Luc转基因细胞，按一定细胞密度种板，培养16～20 h后吸弃培养基，将rhFSH-Fc倍比稀释加入细胞板，药物作用一段时间后加入荧光素酶检测试剂，通过荧光素酶检测系统对rhFSH-Fc进行生物性活性检测，并对各试验条件参数优化及进行方法学验证。结果:rhFSH-
【基金项目】
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国家科技重大专项课题资助项目（2018ZX09101001-003-004）；
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目的:利用转基因细胞法建立重组人促卵泡激素Fc融合蛋白（rhFSH-Fc）生物学活性检测方法。方法:利用CHO-K1-FSHR-CRE-Luc转基因细胞，按一定细胞密度种板，培养16～20 h后吸弃培养基，将rhFSH-Fc倍比稀释加入细胞板，药物作用一段时间后加入荧光素酶检测试剂，通过荧光素酶检测系统对rhFSH-Fc进行生物性活性检测，并对各试验条件参数优化及进行方法学验证。结果:rhFSH-Fc在该方法中存在量效关系且符合四参数曲线方程，R~2大于0.99;方法优化后确定细胞种板密度为5×10~5个·mL-1,rhFSH-Fc稀释起始浓度为750 ng·mL-1,1∶5倍的稀释倍数，诱导时间为4 h,样品稀释液为DMEM/F12K+10%FBS。该方法具有良好的专属性，9次独立日间、日内精密度检测RSD均小于5%,5个不同稀释组回收率样本经6次测定，相对效价分别为（51±2.00）%、（78±2.05）%、（94±2.23）%、（124±3.46）%、（141±4.45）%;对应回收率平均值分别为（101±3.94）%、（104±3.00）%、（94±2.24）%、（99±2.68）%、（94±3.03）%,RSD均小于4%。结论:本研究利用转基因细胞成功建立rhFSH-Fc生物学活性测定方法，该方法操作简便，重复性好，准确性高，可用于rhFSH-Fc产品的常规检测。
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