百合中车前草花叶病毒的实时荧光定量PCR检测

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车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus,P1AMV)病是侵染百合等作物的危险性病害,亟待建立其监测防控体系,以防止其扩散传播.根据PlAMV的外壳蛋白(Coat protein,CP)基因的保守序列设计特异性检测引物,通过对引物浓度和反应退火温度进行优化,建立了以CP-2 F/R为特异引物,引物浓度为10 μmol·L-1,退火温度为59.4℃的高效实时荧光定量PCR检测技术.该检测技术特异性强,灵敏度是RT-PCR的100倍,病毒最低检出浓度为13 copies·μL-1.对75份田间百合样品进行检测,结果显示:RT-qPCR方法检测(29份,38.67%)高于RT-PCR检测出的阳性样品(21份,28.00%).
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