【摘 要】
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亚油酸异构酶可特异性地催化亚油酸转化为活性共轭亚油酸异构体。本研究采用PCR技术从疱疮丙酸杆菌GIM1.243中扩增出亚油酸异构酶基因PAI,片段长1275bp。按照目标宿主亚麻芥
【机 构】
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吉林农业大学生命科学学院生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;
【基金项目】
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吉林省科技厅项目(20170101015JC);吉林农业大学博士启动资金(2015012)共同资助
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亚油酸异构酶可特异性地催化亚油酸转化为活性共轭亚油酸异构体。本研究采用PCR技术从疱疮丙酸杆菌GIM1.243中扩增出亚油酸异构酶基因PAI,片段长1275bp。按照目标宿主亚麻芥的密码子偏好性对该基因部分序列进行优化,命名为CaPAI。借助双T-DNA表达载体pSB130,用菜豆种子特异性启动子PhaP替换原有的CaMV35S启动子,驱动CaPAI,终止子替换成菜豆的终止子PhaT;另一个T-DNA保留其原有的表达框,其中含有潮霉素筛选标记基因。通过农杆菌介导的FloraDip转化法,将构建好的高效植物表达载体pSB130-PhaP-CaPAI-PhaT转入亚麻芥中,抗性筛选和PCR鉴定显示CaPAI基因已整合进亚麻芥基因组中。
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