AMP激活的蛋白激酶α2大肠杆菌双杂交诱饵重组质粒的构建及鉴定

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目的构建大肠杆菌双杂交系统的诱饵重组质粒。方法PCR扩增大鼠AMP激活的蛋白激酶α2(AMP-aetivated protein kinasea2,AMPKα2)蛋白编码区cDNA,与大肠杆菌双杂交表达载体pBT构建融合蛋白表达质粒pBT—AMPKα2。经酶切和测序鉴定后,将pBT-AMPKα2转化XL-1 Blue MRF’大肠杆菌报告菌株,检测诱饵融合蛋白的表达。并用pBT—AMPKα2和pTRG空载体共转化XL-1 Blue MRF’菌株,通过3-氨基-1,2,4-三唑(3-amino-1,2,4-
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