【摘 要】
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目的：构建携带小鼠SOX9基因的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质细胞中的表达。方法：从含有小鼠SOX9基因的质粒提取总RNA,利用RT-PCR方法扩
【基金项目】
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国际科技合作项目(编号:2010DFA32450);国家自然科学基金资助项目(编号:30973048);国家人事部及山西省人事厅留学回国人员科技活动择优资助项目;山西省留学基金项目(编号:107);山西省自然科学基金资助项目(编号:2010011050-6)~~
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目的：构建携带小鼠SOX9基因的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质细胞中的表达。方法：从含有小鼠SOX9基因的质粒提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增目的基因。连接目的基因与经Age-Ⅰ酶切线性化的慢病毒载体,转化感受态的大肠杆菌对质粒进行扩增,筛出阳性转化子,经293T细胞包装,收集病毒后,通过基因测序和限制性核酸内切酶酶切的方法对质粒进行鉴定。Lenti-SOX9-EGFP体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效
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