【摘 要】
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目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)C5orf66-AS1基因对直肠癌细胞增殖、侵袭及Wnt/β-catenin通路的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测C5 orf66-AS1在人正常直肠粘膜上皮细胞及直肠癌细胞株SW837、SW1463、HR-8348、COLO741的表达水平.设计并合成C5 orf66-AS1的siRNA和阴性对照si-NC,实验分组为:NC组、si-NC组、si-C5 orf66-AS1-1组、si-C5 orf66-AS1-2组、si-C5 orf66-A
【机 构】
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河北医科大学第一医院 外科,河北 石家庄 050011
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目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)C5orf66-AS1基因对直肠癌细胞增殖、侵袭及Wnt/β-catenin通路的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测C5 orf66-AS1在人正常直肠粘膜上皮细胞及直肠癌细胞株SW837、SW1463、HR-8348、COLO741的表达水平.设计并合成C5 orf66-AS1的siRNA和阴性对照si-NC,实验分组为:NC组、si-NC组、si-C5 orf66-AS1-1组、si-C5 orf66-AS1-2组、si-C5 orf66-AS1-3组,qRT-PCR分析C5 orf66-AS1的沉默效率;CCK-8、Annexin V-FITC/PI双染及Transwell小室检测沉默C5 orf66-AS1对直肠癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响;Western blot检测沉默C5 orf66-AS1对细胞中β-catenin、PCNA、Caspase-3和Vimentin蛋白表达的影响.结果 C5 orf66-AS1在直肠癌细胞株SW837、SW1463、HR-8348、COLO741的表达水平显著高于人正常直肠粘膜上皮细胞,且在SW837细胞表达水平最高(P<0.05).si-C5orf66-AS1-1组、si-C5orf66-AS1-2组、si-C5orf66-AS1-3组C5orf66-AS1表达水平显著低于NC组和si-NC组(P<0.05),且si-C5orf66-AS1-3组C5 orf66-AS1的沉默效率最高.沉默C5 orf66-AS1可显著下调SW837细胞增殖活性、侵袭能力以及β-catenin、PCNA和Vim-entin蛋白表达,可显著上调SW837细胞凋亡率及Caspase-3的表达(P<0.05).结论 C5orf66-AS1在直肠癌细胞中高表达,下调C5 orf66-AS1的表达可能通过抑制Wnt/β-catenin通路的激活进而抑制直肠癌细胞的增殖、侵袭,并促进其凋亡.
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