小麦TaSIM蛋白的原核表达与纯化及Western blotting检测

来源 :分子植物育种 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sven1989
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了获得TaSIM (salinity-induced R2R3-MYB)基因的纯化蛋白,以便研究TaSIM转录因子的DNA结合特异性。本研究以含有pET28a-TaSIM原核表达载体的大肠杆菌BL21为材料,用0.5 mmol/L IPTG,在37℃诱导TaSIM融合蛋白表达2 h,收集上清液,采用Ni-NTA柱纯化含有His标签的TaSIM融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测结果表明获得了分子量大小约为33 kD的TaSIM融合蛋白。采用Western blotting检测TaSIM融合蛋白的表达,以鼠抗血清和辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠IgG为抗体,结果表明TaSIM融合蛋白能够和抗体特异结合,说明诱导的蛋白是TaSIM融合蛋白。研究结果为进一步利用凝胶阻滞方法检验TaSIM蛋白与顺式作用元件的结合奠定实验基础。
其他文献
<正>太阳光芒万丈,令人不能直视。但一滴水珠却能掀开那耀眼华丽的外衣,让我们看到一个真实的七彩的太阳。生活也是这样,往往一件小事却能折射出
前言 上世纪20年代,人们开始发现黄酮类化合物具有很高的药用价值。这类化合物在抗炎、抗变态反应、抗微生物、抗肿瘤等多方面都有一定的药理作用。黄芩类是黄酮类化合物中
目前在中国,土压平衡盾构施工技术以其技术和经济上的优越性,己经成为隧道建设的主流,土压平衡盾构施工技术正进入了黄金发展期。土压平衡盾构施工能否顺利进行的关键技术之
一、研究背景与意义(一)老年人口数量不断上升,“老龄化”现象严重人口老龄化是社会发展进步的必然产物,是人类文明的标志。第二次世界大战结束后,随着经济、社会和现代医学
本文以时间为经、事件为纬,从“安西四镇、吐蕃和突厥余部”、“屈底波时代与750年前的中亚”、“关于怛逻斯战役研究的几个问题”三个专题入手,探讨其内在逻辑联系,旨在阐明唐
激光打标机是集激光、光学、机械、电子和计算机等技术于一体的机电一体化设备。激光打标是利用高能量密度的激光束在物件表面制作永久性标记。激光打标已经在很多领域取代传
<正>如北京人皆知全聚德烤鸭,天津人离不开狗不理包子一样,山西人对六味斋酱肉可谓情有独钟的,有这样一句老话:“杏花村里老白汾,太原城内六味斋”。为什么老百姓对六味斋如
研究调查了云南哀牢山中山常绿阔叶林和广西猫儿山中山落叶水青冈林中共生的常绿和落叶阔叶树光合特性在2005年的季节变化,探讨了两地温度气候差异对植物优势度的影响。在夏
建筑业在我国GDP中占有很大比重,是我国经济新常态背景下保持经济增速的重要产业之一。但由于人口红利消失和环境污染等方面的压力,如果依旧保持传统模式,就无法保障建筑业的
文章研究的地方特色产业基地是区域经济发展的载体和支撑。目前特色产业基地建设存在的主要问题是企业规模偏小、创新能力不强、基地的集聚效应不明显、政策扶持力度不够。为