【摘 要】
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用PCR方法从嗜热古细菌Pyrococcus furiosus的基因组DNA中扩增出胞外α-淀粉酶完整结构基因,插入表达载体pET28a中构建成质粒pET-amy(sig+),以质粒pET-amy(sig+)为底物扩增出
【机 构】
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江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室
【基金项目】
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教育部骨干教师资助计划(No.1696)
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用PCR方法从嗜热古细菌Pyrococcus furiosus的基因组DNA中扩增出胞外α-淀粉酶完整结构基因,插入表达载体pET28a中构建成质粒pET-amy(sig+),以质粒pET-amy(sig+)为底物扩增出不含信号序列的α-淀粉酶成熟肽基因片断,获得质粒pET-amy(sig-),将重组质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3).在T7启动子和lac 操纵子控制下,通过IPTG的诱导在重组大肠杆菌细胞内分别表达出含信号肽和不含信号肽的融合蛋白.其中不含信号肽的融合蛋白具有与P. furiosus
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