SARS-CoV GDH株N蛋白全长基因克隆及其可溶性表达

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目的构建SARS冠状病毒N蛋白的原核表达质粒,诱导重组蛋白表达并纯化,鉴定其抗原性.方法以我国SARS冠状病毒GDH株总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增N 蛋白的全长基因,TA克隆后测序.构建pET-23d的N基因表达载体,用IPTG诱导目的蛋白表达,利用硫酸铵沉淀、分子筛层析及离子交换层析纯化重组蛋白,免疫印迹鉴定重组蛋白.结果 RT-PCR扩增出1269bp SARS冠状病毒N蛋白的基因片段,其序列分析结果与SARS-CoV GD01、BJ01株的同源性为99.92%;该基因在大肠杆菌表达系统中
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