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目的
探讨氧化还原酶基因(WWOX)对甲状腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。
方法将携有WWOX基因的真核表达载体体外转染甲状腺乳头状癌细胞株K1(重组质粒组),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染空载质粒(空质粒组)及未经转染(空白对照组)的K1细胞作为对照。合成针对WWOX的靶向小干扰RNA(WWOX siRNA组)转染甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1,以空白细胞(空白对照组)和转染脂质体试剂(脂质体对照组)作为对照组。采用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染前后WWOX基因m RNA水平。采用Western blot法分析WWOX基因对甲状腺乳头状癌凋亡相关蛋白的影响。
结果重组质粒组细胞中WWOX m RNA能稳定表达,是空质粒组及空白对照组细胞WWOX m RNA表达的4. 5倍(P< 0. 05)。WWOX siRNA组WWOX mRNA表达明显下降,是对照组的0. 2倍(P<0. 05)。重组质粒组较空质粒组及空白对照组凋亡相关蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P< 0. 05)。相反,WWOX siRNA组与对照组比较,细胞凋亡相关蛋白表达明显下降(P< 0. 05)。
结论WWOX基因能促进甲状腺癌细胞的凋亡,其机制可能与激活线粒体凋亡信号通路有关。