【摘 要】
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本研究旨在探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的A549细胞凋亡以及caspase-12表达的影响。取对数生长期的A549细胞,随机分为对
【机 构】
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温州医科大学缺血-再灌注损伤研究所; 湖北省中西医结合医院病理科;
【基金项目】
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supported by the Public Technology Research Project(No.2013C33168);the Xinmiao Talent Project of Zhejiang Province,China(No.2014R413043);the Public Science and Technology Project of Wenzhou Municipa
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本研究旨在探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的A549细胞凋亡以及caspase-12表达的影响。取对数生长期的A549细胞,随机分为对照组、DEX组、H/R组和DEX+H/R组。对照组和DEX组细胞常氧培养30 h,H/R组和DEX+H/R组细胞缺氧6 h、复氧24 h建立H/R模型,其中DEX组和DEX+H/R组给予1 nmol/L DEX干预。造模结束后用倒置显微镜观察细胞形态学的变化;原位末端标记(TUNEL)法检测A549细胞的凋亡指数(apoptotic index,AI);CCK-8法检测A549细胞活力;caspase-3活性检测试剂盒检测各组caspase-3酶的活性;Western blot和RT-PCR分别检测A549细胞GRP78、caspase-12蛋白和mRNA的表达水平。结果显示,与对照组相比较,H/R组细胞发生融合现象,形态呈多边型改变,细胞活力明显降低(P<0.01),凋亡细胞数增加,AI值升高(P<0.01);caspase-3酶活性上升(P<0.01);GRP78、caspase-12蛋白和m RNA表达显著上升(P<0.01)。经DEX干预后,与H/R组相比较,DEX+H/R组细胞损伤减轻,细胞活力上调(P<0.01);凋亡细胞数减少,AI值显著下降(P<0.01),caspase-3酶活性显著下降(P<0.01);caspase-12蛋白和mRNA表达下降(P<0.01)。本研究结果表明,DEX对H/R损伤时的A549细胞具有一定的保护作用,其机制可能与其下调caspase-12的表达、抑制细胞凋亡有关。
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