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采用胶原酶门静脉灌注法分离乳猪肝细胞,旋转振荡法进行乳猪肝细胞的球形聚集培养,旨在探索一种新颖的肝细胞培养方法用于生物人工肝.台盼蓝拒染法判定细胞活力,同时分别采用光镜、透射电镜和扫描电镜进行培养肝细胞的形态学检测.结果显示:肝细胞的产量平均为(42～50)×106个/g肝组织,即时存活率达(90±5)%;旋转振荡法进行乳猪肝细胞的球形聚集培养, 24h后绝大多数细胞形成了球形聚集体,细胞超微结构正常且保持了较高活性.旋转振荡法是一种简便、经济的球形聚集培养肝细胞的方法.