【摘 要】
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目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株.方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(
【机 构】
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南方医科大学流行病学教研室,中国疾病预防控制中心传染病研究所,南方医科大学南方医院感染内科
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目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株.方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记.以pCVD442作为载体,构建含有irp8部分序列和irp5基因的重组自杀质粒pCO85.以EAggEC O42为出发菌株,构建缺失irp8～irp5约24 kb的HPI毒力岛功能核心区区域的全岛缺失株EAG85.结果通过接合转移和同源重组,利用蔗糖抗性筛选,pCO85上的同源序列有效的置换了EA
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