【摘 要】
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为探究miR-124在胶质瘤细胞免疫逃逸中的作用及分子机制,qPCR法检测胶质瘤患者肿瘤组织及正常组织中miR-124表达量;ELISA和qPCR检测IL-2刺激下NK细胞系(NK-92)中IFN-γ和miR-
【机 构】
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南阳市中心医院神经内科,南阳473003;桂林医学院附属医院神经内科,桂林541001;沈阳军区总医院神经内科,沈阳 110016
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为探究miR-124在胶质瘤细胞免疫逃逸中的作用及分子机制,qPCR法检测胶质瘤患者肿瘤组织及正常组织中miR-124表达量;ELISA和qPCR检测IL-2刺激下NK细胞系(NK-92)中IFN-γ和miR-124表达量;共培养NK细胞与胶质瘤U251细胞,细胞毒实验检测NK细胞中过表达miR-124对细胞毒性及IFN-γ水平的影响;生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀实验验证miR-124和信号转导及转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)的靶向调控关系;Western blotting检测过表达和抑制miR-124表达对STAT3蛋白水平的影响;细胞毒实验检测共转染过表达pcDNA-STAT3载体对miR-124作用下NK细胞对U251细胞细胞毒性及IFN-γ水平的影响.结果 显示,与正常组织相比,miR-124在患者胶质瘤组织中的表达量显著降低(P＜0.05);与对照组相比,IFN-γ和miR-124在IL-2激活的NK-92细胞中表达量显著增加(P＜0.05);miR-124过表达通过促进NK细胞分泌IFN-γ显著促进NK细胞细胞毒性;miR-124与STAT3存在直接靶向作用;过表达miR-124显著抑制IL-2作用下NK-92细胞STAT3蛋白水平,抑制miR-124表达则促进STAT3蛋白表达;转染pcDNA-STAT3可逆转过表达miR-124对NK细胞细胞毒性、IFN-γ分泌的影响.以上结果表明,miR-124通过靶向抑制STAT3抑制胶质瘤细胞U251免疫逃逸.
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