【摘 要】
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目的:构建编码反义人端粒酶RNA组分的重组逆转录病毒载体,以用于肿瘤的基因治疗。方法:用PCR方法获得目的基因-人端粒酶RNA组分(hTERC),酶切分析及DNA测序进行鉴定,用T4连接
【机 构】
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山东大学附属省立医院消化科,山东大学附属省立医院中心实验室,
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目的:构建编码反义人端粒酶RNA组分的重组逆转录病毒载体,以用于肿瘤的基因治疗。方法:用PCR方法获得目的基因-人端粒酶RNA组分(hTERC),酶切分析及DNA测序进行鉴定,用T4连接酶连接酶切产物,PCR以及EcoR1和BamH1双酶切鉴定重组逆转录病毒载体。结果:hTERC大小为490bp。DNA测序表明,pMD-hTERC中插入的hTERC与NCBI上的序列进行比对,同源性达到99%。重组逆转录病毒载体PLXSN-hTERC经EcoR1和BamH1双酶切后,可见到大小分别为5900bp和500bp的两条带。结论:编码反义人端粒酶RNA组分的重组逆转录病毒载体已构建成功,是一个很有前景的抗肿瘤治疗策略。
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