研究凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3及Glypicante1(Gpc1)的表达对神经胶质瘤细胞增殖能力的影响及其可能机制。
方法取广东省人民医院神经外科自2011年1月至2011年12月手术切除的52例胶质瘤标本和同期因脑外伤行颅内减压术的13例患者的正常脑组织标本，免疫组化染色检测标本中Caspase-3和Gpc1的表达；体外常规培养人神经胶质瘤A172细胞株，构建peDNA3.1 /Gpc1高表达质粒，Luciferase双荧光素酶报告基因试剂盒检测0.5、1、2、4 μg peDNA3.1/Gpc1高表达质粒转染A172细胞后Hedgehog(Hh)信号通路活性的变化；用siRNA-Gpc1干扰质粒转染A172细胞沉默Gpc1的表达，再使用8 μg/mL抗生素杀稻瘟菌素S处理细胞24 h(实验组)，以加入等量溶剂的正常A172细胞作为对照组，免疫组化染色检测2组细胞CyclinD1的表达，噻唑蓝(MTT)检测转染后24、48、72和96 h 2组细胞的增殖活力。
结果神经胶质瘤组织Caspase-3、Gpc1表达阳性率均高于正常脑组织，差异有统计学意义(P<0.05)，神经胶质瘤标本中Caspase-3与Gpc1的表达呈正相关关系(r=0.486，P=0.000)；与对照组比较，0.5、1、2、4 μg peDNA3.1/Gpc1高表达质粒组细胞荧光强度增加，差异有统计学意义(P<0.05)；免疫组化染色显示沉默Gpc1的表达后A172细胞Hh通路中靶基因CyclinD1的表达低于正常A172细胞。MTT检测显示沉默Gpc1的表达后48、72、96 h A172细胞株的增殖活力均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。
结论Caspase-3与Gpc1蛋白的表达异常在神经胶质瘤细胞增殖中起重要作用，可能与Hh信号通路的介导有关。