【摘 要】
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目的:通过小RNA测序及siRNA基因敲减/过表达技术,探索半夏白术天麻汤内皮保护的作用靶点.方法:体外培养人主动脉内皮细胞(HAEC),50μg/mL氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导细胞
【机 构】
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山东中医药大学,济南250355;山东中医药大学附属医院,济南250014;山东中医药大学,济南250355;山东中医药大学附属医院,济南250014
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目的:通过小RNA测序及siRNA基因敲减/过表达技术,探索半夏白术天麻汤内皮保护的作用靶点.方法:体外培养人主动脉内皮细胞(HAEC),50μg/mL氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导细胞损伤,1h后加入2m g/mL半夏白术天麻汤继续培养24h,未处理的HAEC细胞作为正常对照组.小RNA测序筛选差异microRNA (miRNA),并基于siRNA敲减/过表达miRNA-217-5p(即miR-217),同步给予半夏白术天麻汤干预,观察miRNA-217的表达及其对细胞增殖的影响.结果:经小RNA测序,ox-LDL诱导后90个miRNA差异表达,半夏白术天麻汤干预后,共筛选出157个差异miRNA(93个上调,64个下调)(FC＞2.0,P＜0.05),其中60个共有差异miRNA,提示半夏白术天麻汤逆转了ox-LDL诱导的66.67％的miRNA改变,共有基因中差异最显著的是miRNA-217.miRNA-217敲减/过表达后,细胞增殖水平发生相应的变化;半夏白术天麻汤的干预效果在miRNA-217敲减后下降,而miRNA-217过表达可增强半夏白术天麻汤的药效.结论:miRNA-217是半夏白术天麻汤的重要靶点,半夏白术天麻汤通过上调miRNA-217,促进内皮细胞增殖,发挥内皮保护作用.
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