【摘 要】
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目的 探讨环状RNA Cdr1as/miR-7/SP1轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞转染miR-7模拟物、sh-Cdr1as、转录因子SP1 siRNA前后,正常乳腺MCF-10A细胞及乳腺癌组织中环状RNA Cdr1as、miR-7、SP1 mRNA的表达水平;MDA-MB-231、MCF-7细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)mRNA的表达水平;采用Transwell实验分析M
【机 构】
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325200 瑞安市人民医院(温州医科大学附属第三医院)甲乳外科
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目的 探讨环状RNA Cdr1as/miR-7/SP1轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞转染miR-7模拟物、sh-Cdr1as、转录因子SP1 siRNA前后,正常乳腺MCF-10A细胞及乳腺癌组织中环状RNA Cdr1as、miR-7、SP1 mRNA的表达水平;MDA-MB-231、MCF-7细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)mRNA的表达水平;采用Transwell实验分析MDA-MB-231、MCF-7细胞的侵袭和迁移能力;Western blot法检测MDA-MB-231、MCF-7细胞中E-cadherin及Vimentin蛋白的表达情况.结果 与MCF-10A细胞相比,MDA-MB-231、MCF-7细胞环状RNA Cdr1as表达上调,miR-7表达下调,SP1 mRNA表达上调(均P<0.05).与转染前相比,MCF-7、MDA-MB-231细胞转染sh-Cdr1as后,miR-7表达上调(均P<0.05),SP1 mRNA表达下调(均P<0.05);而转染miR-7 mimics后,SP1 mRNA表达下调(均P<0.05).与转染前相比,MDA-MB-231、MCF-7细胞转染sh-Cdr1as后,侵袭细胞数明显减少(均P<0.05).与乳腺导管原位癌患者相比,乳腺浸润性导管癌环状RNA Cdr1as表达上调(P<0.05);与无腋窝淋巴结转移患者相比,有腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者环状RNA Cdr1as表达上调(P<0.05);Pearson相关性分析显示环状RNA Cdr1as与miR-7的表达存在负相关(r=-0.541,P<0.05),miR-7与SP1 mRNA的表达也存在负相关(r=-0.467,P<0.05).MDA-MB-231、MCF-7细胞转染SP1 siRNA后,E-cadherin mRNA、蛋白表达均上调(均P<0.05),Vimentin mRNA、蛋白表达均下调(均P<0.05).结论 乳腺癌细胞环状RNA Cdr1as表达上调,通过环状RNA Cdr1as/miR-7/SP1调控轴促使癌细胞发生上皮间质转化,使乳腺癌细胞发生侵袭和转移.环状RNA Cdr1as可能成为乳腺癌治疗的新靶点.
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