探讨高迁移率族蛋白B1/核转录因子-κB(HMGB1/NF-κB)信号通路在苦柯胺B(KB)对脓毒症小鼠肺保护中的重要作用。
方法成年雄性C57BL/6小鼠30只,按随机数字表法分为对照组、脂多糖(LPS)模型组和KB干预组,每组10只。经腹腔注射LPS 20 mg/kg制备脓毒症小鼠模型;对照组注射等量生理盐水;KB干预组于制模后4 h经尾静脉注射KB 20 μg/kg。各组于制模后24 h取全血及肺脏组织,测定肺湿/干重(W/D)比值、髓过氧化物酶(MPO)活性及支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量;蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织中HMGB1、NF-κB蛋白表达。
结果与对照组比较,LPS模型组肺W/D比值、MPO活性、BALF中蛋白含量、血浆和肺组织中TNF-α、IL-1β含量及肺组织中HMGB1、NF-κB蛋白表达均显著升高〔肺W/D比值:6.84±0.42比3.36±0.31,肺MPO(U/g):36.46±2.72比2.32±0.52,BALF蛋白含量(g/L):6.21±1.35比0.35±0.12,血浆TNF-α(ng/L):36.31±1.53比8.53±0.82,肺TNF-α(ng/L):65.35±2.32比12.36±1.47,血浆IL-1β(ng/L):64.26±7.53比28.83±5.74,肺IL-1β(ng/L):542.36±14.47比58.46±7.24,肺HMGB1(灰度值):316.43±4.26比100.21±0.06,肺NF-κB(灰度值):465.84±6.38比100.15±0.08,均P<0.05〕,说明LPS诱导小鼠脓毒症模型制备成功,出现肺损伤。与LPS模型组比较,KB干预组上述各指标均显著降低〔肺W/D比值:4.56±0.43比6.84±0.42,肺MPO(U/g):14.83±1.47比36.46±2.72,BALF蛋白含量(g/L):2.33±1.24比6.21±1.35,血浆TNF-α(ng/L):12.53±0.42比36.31±1.53,肺TNF-α(ng/L):32.27±1.41比65.35±2.32,血浆IL-1β(ng/L):42.37±6.24比64.26±7.53,肺IL-1β(ng/L):314.42±17.38比542.36±14.47,肺HMGB1(灰度值):224.57±3.42比316.43±4.26,肺NF-κB(灰度值):258.73±5.42比465.84±6.38,均P<0.05〕,说明KB对脓毒症小鼠肺脏具有明显的保护作用。
结论KB可以通过抑制HMGB1/NF-κB信号通路蛋白表达减轻LPS介导的脓毒症小鼠肺脏炎症反应过度活化,从而发挥肺脏保护作用。