【摘 要】
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目的探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在肾癌中的表达，以及在肾癌786-O细胞中对增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用，以及对微小RNA-506(microRNA-506，miR-506)/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)信号通路的影响。方法选取2018年1月至2019年12月武汉大学人民医院收集的38例肾癌组织及癌旁组织样本作为研究对象，采用实时定量反转录聚合酶链反应(
【机 构】
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武穴市第一人民医院泌尿外科 435400;皖南医学院弋矶山医院泌尿外科，芜湖 241000,武穴市第一人民医院泌尿外科 435400,武穴市第一人民医院泌尿外科 435400,武穴市第一人民医院泌尿外
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目的探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在肾癌中的表达，以及在肾癌786-O细胞中对增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用，以及对微小RNA-506(microRNA-506，miR-506)/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)信号通路的影响。
方法选取2018年1月至2019年12月武汉大学人民医院收集的38例肾癌组织及癌旁组织样本作为研究对象，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肾癌组织及相应癌旁正常组织临床样本中lncRNA NEAT1的表达水平；使用在线数据库及采用荧光素酶实验验证NEAT1和miR-506以及EZH2和miR-506的靶向关系；采用噻唑蓝(MTT)法，双染法流式细胞术和细胞迁移侵袭(Transwell)实验观察细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭水平的改变；采用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)法分别测miR-506和EZH2蛋白的表达。组间比较采用t检验。
结果lncRNA NEAT1在肾癌组织中表达水平(4.45±0.31)高于癌旁组织(2.39±0.25)，差异有统计学意义(t＝8.959，P<0.05)。荧光素酶报告实验结果表明NEAT1序列上有miR-506的结合位点，且EZH2是miR-506的下游靶基因。si-NEAT1组24、48和72 h增殖率[(24.67±3.23)%、(40.82±5.03)%、(56.87±6.12)%]明显低于si-NC组[(62.63±4.35)%、(74.18±6.55)%、(87.45±7.21)%]，差异有统计学意义(t＝-12.135、-6.997、-5.601，P<0.01)。si-NEAT1组凋亡水平[(23.20±1.92)%]显著高于si-NC组[(9.65±1.34)%]，差异有统计学意义(t＝10.024，P<0.05)。si-NEAT1组迁移和侵袭数量[(52.35±4.76)、(21.63±2.05)个]显著低于si-NC组[(91.23±7.59)、(42.68±3.98)个]，差异有统计学意义(t＝-7.517，P<0.05；t＝-8.144，P<0.05)。RT-qPCR结果显示，si-NC及si-NEAT1两组的miR-506 mRNA表达量分别为1.00±0.00、3.39±0.26，差异有统计学意义(t＝15.922，P<0.05)。si-NEAT1组EZH2蛋白表达水平(0.15±0.02)明显低于si-NC组EZH2蛋白表达水平(0.32±0.03)，差异有统计学意义(t＝-8.167，P<0.05)。
结论LncRNA NEAT1在肾癌中高表达，其可能通过调控miR-506/EZH2信号途径改变肾癌786-O细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的能力。
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