探讨低氧诱导因子－1α(HIF－1α)信号活化在川崎病(KD)患儿Th17/调节性T淋巴细胞(Treg)失衡机制中的作用。
方法急性期KD患儿36例，健康对照组32例。KD患儿分别于IVIG治疗前、后直接取血备检。采用流式细胞术检测Th17细胞、Treg比例及叉头蛋白P3(Foxp3)、IL－10、IL－17A、HIF－1α、磷酸化信号转导和转录活化因子3(pSTAT3)蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD4＋ T淋巴细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、受体相互作用蛋白1(RIP1)、IL－17A、RAR相关孤儿受体γt(RORγt)、p300 mRNA表达；免疫共沉淀－定量PCR及免疫印迹法检测外周血CD4细胞IL－17A基因组蛋白H3乙酰化、Foxp3蛋白泛素化水平；ELISA检测血浆中IL－1β、IL－6、IL－21、IL－23、TNF－α水平。
结果1.急性期KD患儿Th17细胞比例及IL－17A表达显著上升(t＝7.62、9.60，P均<0.05)，Treg细胞比例及转录因子Foxp3、IL－10表达明显降低(t＝5.72、6.82、5.83，P均<0.05)，Th17/Treg细胞比值远高于健康对照组(t＝12.21，P<0.05)，经静脉用丙种球蛋白(IVIG)治疗后均有明显恢复(t＝6.28、8.30、4.75、5.02、3.95、9.39，P均<0.05)。2.急性期KD患儿CD4＋ T细胞IL－17A基因组蛋白H3乙酰化水平及Foxp3蛋白泛素化水平显著上升[H3：(7.32±2.53)% 比(2.60±1.08)%; Foxp3：(42.94±15.91)% 比(11.01±3.60)%，t＝10.20、11.71，P<0.05], HIF－1α、RORγt及p300表达亦明显高于健康对照组(t＝6.02、6.92、6.01，P均<0.05)，经IVIG治疗后均显著降低[H3：(4.63±2.07)% 比(7.32±2.07)%; Foxp3：(26.37±11.58)% 比(42.94±15.91)%；t＝4.94、5.05、3.40、5.31、4.29，P均<0.05]。其中，HIF－1α表达与IL－17A基因组蛋白H3乙酰化水平、Foxp3蛋白泛素化水平呈正相关(r＝0.65、0.52，P均<0.05)。3.急性期KD患儿血浆炎性细胞因子IL－ 1β、IL－6、IL－21、IL－23、TNF－α水平及TLR4表达显著增高(t＝11.00、15.18、7.21、11.09、9.09、3.84，P均<0.05)，其下游信号分子MyD88、pSTAT3、RIP1表达亦明显高于健康对照组(t＝10.07、5.41、8.13，P均<0.05)，经IVIG治疗后均显著降低(t＝7.81、10.59、4.70、6.73、6.49、3.03、6.50、3.63、5.22，P均<0.05)。
结论HIF－1α信号异常活化可能是导致急性期KD患儿Th17/Treg细胞失衡的重要因素之一。