Ⅰ、ⅣfimA型牙龈卟啉单胞菌对内皮细胞与平滑肌细胞共培养体系产生内皮素-1及一氧化氮的影响

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目的研究不同fim A基因型牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)刺激人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)及人脐动脉血管平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMCs)共培养体系产生内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和一氧化氮(NO)的水平。方法用Ⅰfim A型P.gingivalis(ATCC33277)和Ⅳfim A型P.gingivalis(W83)分别刺激HUVECs-HUASMCs共培养体系,于2、8、24、48 h时收集细胞培养上清液,酶联免疫反应检测ET-1的含量,硝酸还原酶法测定NO的含量。各组均设阴性对照组(纯培养基)及阳性对照组(1μg/m L E.coli-LPS)。结果 HUVECs-HUASMCs共培养体系在Ⅰ、Ⅳfim A型P.gingivalis刺激作用下产生ET-1和NO的量以及ET-1/NO水平,与阴性及阳性对照组比较存在差异。Ⅰfim A型P.gingivalis刺激细胞共培养模型分泌ET-1和NO情况的总趋势与阴性对照组相似、而Ⅳfim A型P.gingivalis的刺激作用总趋势则与阳性对照组相似,Ⅳfim A型P.gingivalis较Ⅰfim A型P.gingivalis刺激共培养细胞可分泌更多的ET-1、而NO量减少,Ⅳfim A型P.gingivalis感染48 h的细胞共培养模型表现出明显的ET-1/NO的失衡。结论不同fim A型P.gingivalis刺激共培养模型后产生ET-1及NO的情况及ET-1/NO的水平有明显差异,可能与其本身毒力相关,Ⅳfim A型P.gingivalis比Ⅰfim A型P.gingivalis更易引起内皮功能紊乱。
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